近日，加州年夜學(xué)的科學(xué)家們在 CRISPR 技巧在真核細(xì)胞基因表達的研究上取得新進展，相干研究成果揭橥在2013年7月11日的"Cell"期刊上。

2013年，CRISPRs 成為了生物技巧圈的寵兒，這種基因組編輯技巧更易于操作，也具有更強的擴年夜性。CRISPRs 全稱為規(guī)律成簇距離短回文反復(fù)(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats),生物制藥技術(shù)展是指運用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細(xì)胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法進行藥物制造的技術(shù)。主要學(xué)習(xí)化學(xué)、生物方面的課程。，這是一類廣泛分布于細(xì)菌和古菌基因組中的反復(fù)構(gòu)造。CRISPR 與一系列相干蛋白、前導(dǎo)序列一路，能為原核生物供給對抗噬菌體等外源基因的獲得性免疫才能。

日前，加州年夜學(xué)舊金山分校，伯渴攀利分校等機構(gòu)的科學(xué)家們指出 CRISPR 技巧可以用于真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究， CRISPR 干擾(CRISPRi)可以作為真核細(xì)胞基因表達精確調(diào)控的一種通用對象。

此前這一研究組發(fā)明當(dāng)缺掉核酸內(nèi)切酶活性的 Cas9 與一種導(dǎo)向 RNA 共表達時刻，會產(chǎn)生一種 DNA 辨認(rèn)復(fù)合物，這種復(fù)合物能特異性干擾轉(zhuǎn)錄延長， RNA 聚合酶結(jié)合，或轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,生物發(fā)酵展是生物工程的一個重要組成部分，微生物利用碳水化合物發(fā)酵生產(chǎn)各種工業(yè)溶劑和化工原料。乙醇、丙酮-丁醇、丁醇-異丙醇、丙酮-乙醇、2,3-丁二醇和甘油發(fā)酵是微生物進行溶劑發(fā)酵的幾種形式。。研究人員將這個體系稱為 CRISPR 干擾(CRISPRi )，并指出這一體系能有效克制年夜腸桿菌中靶向基因的表達，并且不會出現(xiàn)脫靶效應(yīng)。并且應(yīng)用 CRISPRi ，還可以同時克制多個靶基因,生酶制劑展是指酶經(jīng)過提純、加工后的具有催化功能的生物制品，主要用于催化生產(chǎn)過程中的各種化學(xué)反應(yīng)，具有催化效率高、高度專一性、作用條件溫和、降低能耗、減少化學(xué)污染等特點，其應(yīng)用領(lǐng)域遍布食品（面包烘烤業(yè)、面粉深加工、果品加工業(yè)等）、紡織、飼料、洗劑劑、造紙、皮革、醫(yī)藥以及能源開發(fā)、環(huán)境保護等方面。酶制劑來源于生物，一般地說較為安全，可按生產(chǎn)需要適量使用，這種感化也是可逆。

在這一基本上，研究人員進一步發(fā)明在不合的調(diào)控功能元件的效應(yīng)位點，參加 dCas9 ，能促進其穩(wěn)定和有效轉(zhuǎn)錄的克制或激活，這一點在仁攀類和酵母細(xì)胞中都獲得了證實。

同時將 dCas9 耦合到轉(zhuǎn)錄克制構(gòu)造域還能極年夜的加強多個內(nèi)源性基因的表達沉默。此外研究人員還應(yīng)用 RNA -seq 分析注解， CRISPR 干擾( CRISPRi )介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄克制特異性很高。

這些研究數(shù)據(jù)均注解，研究人員建立的 CRISPR 體系可以作為一個模塊化，靈活的 DNA 結(jié)合平臺，用于針對靶向 DNA 序列蛋白召集，這也注解 CRISPRi 可以作為真核細(xì)胞基因表達精確調(diào)控的一種通用對象。

此前，懷特海德生物醫(yī)學(xué)研究所的科學(xué)家在《細(xì)胞》(Cell)雜志上揭橥的一項研究成果將再次徹底改變遺傳工程動物模型的構(gòu)建方法，甚至有可能從新定義哪些物種可作為模式生物。這是第一次應(yīng)用這種稱作CRISPR/Cas的體系，在一個多細(xì)胞生物體內(nèi)改變多個基因。研究人員表示這一過程操作異常簡單，將會普及至各個實驗室。
 

原文鏈接：

CRISPR-Mediated Modular RNA-Guided Regulation of Tranｓｃｒｉｐｔion in Eukaryotes. Luke A. Gilbert, Matthew H. Larson, Leonardo Morsut, Zairan Liu, Gloria A. Brar, Sandra E. Torres, Noam Stern-Ginossar, Onn Brandman, Evan H. Whitehead, Jennifer A. Doudna, Wendell A. Lim, Jonathan S. Weissman. DOI: 10.1016/j.cell.2013.06.044